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    POLYSCIENCES上海鼎桑代理

    POLYSCIENCES上海鼎桑代理

    更新時(shí)間:2024-06-12

    產(chǎn)品特點(diǎn):
    POLYSCIENCES上海鼎桑代理 美國POLYSCIENCES公司成立于1961年,主要生產(chǎn)和經(jīng)營(yíng)LIFE SCIENCES生命科學(xué)(膠體金,不含甲醛的甲醇等),病理學(xué)和顯鏡學(xué) 微球和粒子和磁珠各種單體和聚體等產(chǎn)品。polysciences公司是世界上zui大zui全的多聚化合物供應商,同時(shí)是世界*的免疫學(xué),組織化學(xué)試劑耗材供應商.
    產(chǎn)品介紹
    產(chǎn)地進(jìn)口加工定制

    代理優(yōu)勢品牌:tedpella 、Transgenomics(IDT)  突變檢測試劑盒 、mattek 培養皿  、Megazyme 試劑盒、Avanti  標準品、Alzet 滲透壓泵、 DSHB抗體、moltox 菌株、Toxin Technology 毒素、Jena Bioscience、 Goldbio、teknova培養基、Altogen Biosystems   轉染試劑、Scientific Commodities  PE管、Coriell Institute DNA和細胞 、List毒素、BrainBits 培養基、Spectrum 膜、Neuromab 抗體 、BBI solutions膠體金 、braintree scientific 耗材pe管、AK Scientific抑制劑等、sutter 玻璃電極管、Reaschdiets小鼠食料

    我們公司zui大優(yōu)勢是強大的采購

      上海鼎桑生物科技有限公司一家專(zhuān)注于生命科學(xué)的科技企業(yè),由在國內科研試劑領(lǐng)域有著(zhù)豐富從業(yè)經(jīng)驗的技術(shù)團隊和管理團隊組建而成,專(zhuān)營(yíng)進(jìn)口生物試劑,科學(xué)儀器,實(shí)驗消耗品等。
           公司將不斷把上優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品引入國內市場(chǎng),滿(mǎn)足客戶(hù)的需求,公司也將緊跟生命科學(xué)的發(fā)展,為廣大科研工作者探索生命科學(xué)的奧秘奉獻綿薄之力.

    POLYSCIENCES上海鼎桑代理

    POLYSCIENCES上海鼎桑代理

    POLYSCIENCES公司成立于1961年,主要生產(chǎn)和經(jīng)營(yíng)LIFE SCIENCES生命科學(xué)(膠體金,不含甲醛的甲醇等),病理學(xué)和顯鏡學(xué) 微球和粒子和磁珠各種單體和聚體等產(chǎn)品。polysciences公司是世界上zui大zui全的23966上海鼎桑代理 多聚化合物供應商,同時(shí)是世界*的免疫學(xué),組織化學(xué)試劑耗材供應商.

    上海鼎桑polysciences 23966大量現貨供應

    轉染試劑線(xiàn)性PEI溶液的配制(1mg/ml)

    聚乙烯亞胺(Polyethylenimine,PEI)是聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽(yáng)離子電荷密度的有機大分子,每相隔二個(gè)碳個(gè)原子,即每“第三個(gè)原子都是質(zhì)子化的氨基氮原子,使得聚合物網(wǎng)絡(luò )在任何pH下都能充當有效的“質(zhì)子海綿”(proton sponge)體。PEI,可用作轉染試劑,它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉染真核細胞。有實(shí)驗證明,分子量25000的線(xiàn)性PEIPolysciences 23966轉染效率zui高。

    下面將主要介紹polysciences 線(xiàn)性PEI(#23966)的產(chǎn)品特性及其溶液的配制過(guò)程。

    1. 產(chǎn)品特性:

    產(chǎn)品名稱(chēng):線(xiàn)性聚乙烯亞胺(PEI)

    CAS號

    9002-98-6,26913-06-4

    分子式

    (CH2CH2NH)n

    分子量

    25000

    熔點(diǎn)

    73-75°C

    外觀(guān)

    白色黃色固體

    結構式

     

    溶解性

    溶于熱水,低pH值的冷水,甲醇和乙醇;不溶于:苯,aether和丙酮

    儲存

    室溫

     

    2. 溶液配制

    此指導說(shuō)明書(shū)是經(jīng)polysciences公司研究,測試及其客戶(hù)反饋的后編寫(xiě)的。下面推薦一種簡(jiǎn)單適用而的方法,講述如何配制濃度為1mg/mL的轉染試劑的配制。

    材料:

    1g #23966、1L 純水(Milli-Q®純水,注射用水(WFI),或類(lèi)似的生物級水)、12 M鹽酸、10 M氫氧化鈉、一次性0.1-0.2µm PES真空無(wú)菌過(guò)濾器、無(wú)菌高聚乙烯或聚丙烯試劑瓶。

    器材:

    1 L 玻璃燒杯、1 L玻璃量筒、核準pH計、2支1 mL塑料移液管、托盤(pán)、聚四氟乙烯(PTFE)攪拌棒、真空泵

    配制過(guò)程:

    1g #23966——900mL水溶解——攪拌、加熱(60-80°C)——加HCl調pH到2.0左右——蓋上燒杯,攪拌3h(直至粉末*溶解)——冷卻至室溫——加NaOH調pH到6.9-7.1——移液到量筒,加水補足至1L——真空過(guò)濾消毒——分裝,-20°C保存。

    備注:加熱或加酸都有助于PEI溶解。當然酸可能不用加那么多,詳細用量可試加一點(diǎn)攪拌看看,足夠溶解就行,不一定需要加到pH那么低。

    試劑儲存:

    冷凍部分溶液可在-20°C保存長(cháng)達一年;部分解凍的溶液可在4°C保存2周,不可反復凍融。

    粉末儲存:

    未開(kāi)封的粉末有效期兩年??稍谑覝叵卤4嬷敝潦褂?。

    轉染操作流程:(瞬時(shí)轉染方法) 轉染效率(部分數據參考,本數據來(lái)源于網(wǎng)絡(luò ),不作為售后投訴依據

    1. 接種細胞: 轉染前一天,用膠原酶(WORTHINGTONG 公司 LS004196)消化細

    胞并計數(不建議用胰酶)。調整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養的器皿,每個(gè)孔置

    入的細胞量應能使轉染時(shí)細胞匯合度達到 70~80%。

    2. 準備 DNA-PEI 復合物: DNA、PEI 試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其

    升至室溫。,用 Opti-MEM ITM(Invitrogen)或其他適合的無(wú)蛋白培養基稀釋適

    DNA。用同樣的培養基稀釋 PEI 試劑。每 1 μg DNA 需用 1-5 μL 線(xiàn)性 PEI 轉

    染試劑。一邊輕輕渦旋裝有 DNA 溶液 的試管,一邊將稀釋的線(xiàn)性 PEI 轉染試劑滴

    加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置 10~25 min 以

    形成 DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時(shí),請用圓底聚丙烯管,例如 NEST 5 mL /14

    mL 離心管。

    3. 轉染細胞: 直接向每個(gè)孔中加入 DNA-PEI 復合物并輕輕渦旋培養板/培養皿。在

    無(wú)血清條件下轉染時(shí),去除生長(cháng)培養基,替換成無(wú)血清培養基,然后滴 DNA-PEI 復

    合物。轉染 3 h 后,添加½體積的包含 30%血清的生長(cháng)培養基。

    4. 孵育細胞和分析結果: 在 CO2 培養箱中 37℃下孵育細胞至可以分析檢測。轉

    染后快 的話(huà)7 h 即可檢測到轉入基因的表達。 請自行確定適合檢測時(shí)間。

     

     

    細胞種類(lèi) 中文名稱(chēng) PEI 轉染效率

    HEK293 人胚腎細胞 90%-95%

    293-T 人胚腎細胞 90%-95%

    CHO-K1 倉鼠卵巢細胞 80%-90%

    U251 人源神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞 80%-90%

    Hela 人源宮頸ai細胞 70%-80%

    COS7 猴 SV40 轉化腎細胞 70%-80%

    HepG2 人源肝癌細胞 70%-80%

    NIH/3T3 小鼠胚胎成纖維細胞 60%-70%

    膠質(zhì)瘤干細胞 人源膠質(zhì)瘤干細胞 60%-70%

    Patu8988 人源胰腺癌細胞 60%-70%

    U2OS 人源骨肉瘤細胞 60%-70%

    轉染試劑和 DNA 配比數據

     

    細胞型號 培養基 每孔細胞數 DNA 的量 轉染試劑量 和培養基混合 4-6h

    293H DMEM 3×10

    4

    0.2µg 0.5µL DMEM+10%FBS

    293FT DMEM 3×10

    4

    0.2µg 0.5µL DMEM+10%FBS

    293E DMEM 3×10

    4

    0.2µg 0.5µL DMEM+10%FBS

    293F DMEM 3×10

    4

    0.2µg 0.5µL DMEM+10%FBS

    COS7 DMEM 1.5×10

    4

    0.4µg 0.5µL DMEM+10%FBS

    hela DMEM 2×10

    4

    0.3µg 0.5µL 1640+15%FBS

    Caco2 MEM 3.5×10

    4

    0.3µg 0.75µL MEM+10%FBS

    BHK21 MEM 2×10

    4

    0.2µg 0.5µL MEM+10%FBS

    CHO-DG44 DMEM+HT+pro 2×10

    4

    0.5µg 0.5µL DMEM+HT+pro +10%FBS

    RAW264.7 DMEM 3×10

    4

    0.2µg 0.5µL DMEM +10%FBS

    MCF7

    MEM/NEAA+0.01mg/mL insulin + sodium

    pyruvat

    2×10

    4

    0.1µg 0.25µL

    MEM/NEAA+0.01mg/mL insulin + sodium

    pyruvat+10%FBS

    SW480 IMDM 3×10

    4

    0.4µg 0.5µL IMDM +10%FBS

    MDCK DMEM 4×10

    4

    0.6µg 1µL DMEM+10%FBS

    CHO-K1 IMDM+Pro 3×10

    4

    0.2µg 0.5µL IMDM+Pro +10%FBS

    HepG2 DMEM 3×10

    4

    0.5µg 0.75µL DMEM+10%FBS

    A549 DMEM 2×10

    4

    0.3µg 0.5µL DMEM+10%FBS

    NIH/3T3 DMEM 1.5×10

    4

    0.1µg 0.75µL DMEM+10%FBS

    vero DMEM 3×10

    4

    0.3µg 0.75µL DMEM+10%FBS

    sf9 SIM SF 5×10

    4

    0.4µg 0.75µL SIM SF+10%FBS



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